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精準突變文庫:定向進化的“高效引擎”
發(fā)布時間:2024-04-29

前言

分子定向進化是利用現(xiàn)代分子生物學(xué)方法,人為模擬自然進化機制,人工合成大量的突變同源基因文庫。采用靈敏的定向篩選策略,創(chuàng)造出自然界不存在的或某些特性有顯著改變的突變蛋白質(zhì)或其他生物分子。



01

精準突變文庫類型


精準突變文庫,融合了基因合成、基因突變和定向進化研究的精華。它通過改變蛋白質(zhì)的特定位點或DNA的調(diào)控區(qū)域,來研究結(jié)構(gòu)和功能之間的關(guān)系。突變文庫的主要類型包括:


丙氨酸掃描文庫

Alanine Scan Library


實現(xiàn)全面突變覆蓋的高級策略

利用丙氨酸體積小同時對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)影響較小的特性,科學(xué)家通過丙氨酸系統(tǒng)地取代其他19個氨基酸殘基的每一個,構(gòu)建了丙氨酸掃描文庫。這種創(chuàng)新方法通過探索單個氨基酸殘基在蛋白質(zhì)功能、活性位點和穩(wěn)定性中的作用,解開了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的秘密。


定點飽和突變文庫

Site-Saturation Mutagenesis Library


實現(xiàn)單點氨基酸的精確突變

將蛋白序列限定區(qū)域內(nèi)的氨基酸位點突變成另外的19種氨基酸,構(gòu)成定點飽和突變文庫。一次只突變一個氨基酸位點,每條序列和模板相比只存在一個氨基酸位點突變。這可以大幅降低引物合成成本,對于突變位點多的高庫容文庫極具優(yōu)勢。

組合突變文庫

Combinatorial Mutagenesis Library


實現(xiàn)多點多種氨基酸的精確突變

將蛋白序列的限定區(qū)域內(nèi)連續(xù)的幾個氨基酸位點同時突變成另外的19種氨基酸,構(gòu)成組合突變文庫。同時突變多個氨基酸位點,每條序列和模板相比存在多個氨基酸位點突變。為研究復(fù)雜蛋白結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系以及進行蛋白工程、抗體研究提供了強大的實驗工具。



02

精準突變文庫構(gòu)建流程


精確突變庫旨在為研究人員提供高度精確的基因突變資源。根據(jù)設(shè)計目的不同,體外合成的精準突變文庫可以更精確、更隨意地控制所研究序列的多樣性,有助于深入探究基因功能和調(diào)控機制?;谛酒瑯?gòu)建精準突變文庫的流程如下:



  1. 通過芯片引物引入突變。
  2. 對樣品中的DNA進行大量PCR擴增。
  3. 將dsDNA片段無縫組裝到質(zhì)粒上。
  4. 對得到的突變文庫進行測序驗證及數(shù)據(jù)分析。


03

精準突變文庫的應(yīng)用領(lǐng)域


定向進化研究:構(gòu)建突變文庫有助于探索基因的功能和調(diào)控機制,推動基礎(chǔ)科學(xué)研究的進展。


酶工程改造:用于改良酶的催化性能和微生物的代謝途徑,為酶工程提供高效、精準的生物工具。


生物醫(yī)藥領(lǐng)域:用于篩選藥物靶點的關(guān)鍵功能區(qū)域,發(fā)現(xiàn)與疾病相關(guān)的新藥物靶點,促進新藥開發(fā)和研究。


農(nóng)業(yè)領(lǐng)域:有助于篩選具有改良性狀的抗體、配體及受體,提高作物產(chǎn)量、抗病性和適應(yīng)性。


食品領(lǐng)域:針對食品中存在的特定蛋白質(zhì)進行定向進化,改善其功能性和營養(yǎng)價值,有助于提升食品的品質(zhì)和營養(yǎng)水平。





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合成生物學(xué)賦能技術(shù)平臺




泓迅生物依托領(lǐng)先設(shè)計和先進制造成功交付了數(shù)百個高質(zhì)量、定制庫化的精準突變文庫。我們根據(jù)您的需求,精心設(shè)計并合成各種DNA精準突變文庫,為您提供定制化基因突變文庫解決方案。


服務(wù)優(yōu)勢

序列控制精準

合成效率高

高度定制化

高性價比方案


泓迅案例


NNK文庫是一種經(jīng)典的簡并突變文庫,所使用的 NNK簡并引物包含了32(4x4x2)種密碼子組合(N= A/C/G/T, K= G/T),覆蓋了所有20種氨基酸,可以將任意位點的氨基酸進行飽和突變。

NNK文庫,5個NNK位點所包含的每種密碼子的比例


References

[1] Wang Y, Xue P, Cao M, Yu T, Lane ST, Zhao H. Directed Evolution: Methodologies and Applications. Chem Rev. 2021 Oct 27;121(20):12384-12444. 

[2] Yu Q, Li Y, Wu B, Hu W, He M, Hu G. Novel mutagenesis and screening technologies for food microorganisms: advances and prospects. Appl Microbiol Biotechnol. 2020 Feb;104(4):1517-1531.

[3] Wang TW, Zhu H, Ma XY, Zhang T, Ma YS, Wei DZ. Mutant library construction in directed molecular evolution: casting a wider net. Mol Biotechnol. 2006 Sep;34(1):55-68.

[4] Williams G J, Domann S, Nelson A, et al. Modifying the stereochemistry of an enzyme-catalyzed reaction by directed evolution[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2003, 100(6): 3143-3148.



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